Le attività previste dal progetto di ricerca sulla paratubercolosi sono articolate in 4 fasi logicamente e temporalmente fra loro collegate.

Nella Fase 1 si procederà alla messa a punto di un protocollo sperimentale per la ricerca e l'isolamento dal latte crudo del Map.
La fase iniziale di sperimentazione prevede la preparazione di un inoculum batterico a titolo noto per la contaminazione artificiale di campioni di latte.
Tali campioni verranno successivamente utilizzati anche per la definizione delle diverse fasi (purificazione, estrazione, amplificazione) di una metodica ad hoc per la quantificazione del batterio nel latte tramite Real Time PCR. I costi previsti per questa fase sono essenzialmente legati a materiali di consumo e prodotti per analisi (provette pronte con terreno, terreni di crescita disidratati, brodi, agar, supplementi per lo sviluppo microbico, colorazioni per Micobatterl, Micobactina J, provette, filtri, altro materiale di laboratorio) alla messa a punto di PCR quantitativa.

Nella Fase 2 si condurrà un'indagine epidemiologica riguardante gli allevamenti che producono latte destinato a latte alimentare che prevede l'utilizzo di un questionario sulla presenza di fattori di rischio per la paratubercolosi in azienda, l'effettuazione di analisi sierologiche su sangue e latte di bovine scelte secondo i criteri epidemiologici allo scopo di individuare gli allevamenti infetti e di determinare la prevalenza dell'infezione a livello regionale e la successiva comparazione dei risultati ottenuti con i risultati delle analisi di laboratorio sul latte di massa (ELISA, colture batteriche, PCR) di cui alla Fase 3 per stabilire l'attendibilità delle analisi sul latte di massa in base ai fattori di rischio.

Nella Fase 3 si determinerà il livello di contaminazione, tramite Real Time PCR, nel latte proveniente da aziende zootecniche risultate positive ai test sierologici di screening ed il successivo isolamento dei "ceppi di campo" e la loro crescita in laboratorio attraverso la semina di terreni selettivi.

L'ultima fase (Fase 4) sarà tesa all'analisi statistica dei dati ottenuti dalle azioni precedenti e, quindi, all'individuazione e alla valutazione dei fattori di rischio per il consumatore considerando i livelli di contaminazione da Map nel latte crudo e l'efficacia dei trattamenti di pastorizzazione.

Approfondimento: Perchè una ricerca sulla paratubercolosi?

Stato di avanzamento del progetto:

Sono stati definiti gli accordi con i laboratori incaricati delle analisi e avviate le relative convenzioni; i partner identificati sono:

Università degli studi di Bologna - Dipartimento di Sanità Pubblica Veterinaria e Patologia Animale.



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